martes, 21 de diciembre de 2010

PRACTICA 1: FROTIS SANGUINEO Y TINCIÓN

REALIZACIÓN DE UN FROTIS SANGUÍNEO

Antes de iniciar la práctica debeis tener en cuenta que vais a trabajar con sangre, y es muy importante que apliqueis las normas de prevención correspondientes.
Ya? Ahora  comenzamos la práctica:

MATERIAL:
Dos  portaobjetos
Una pipeta Pasteur

MUESTRA:
Sangre venosa adecuadamente anticoagulada o sangre capilar.

Figura1: Venas donde realizar la extracción


Cuando tengais todo preparado,  debéis realizar la práctica leyendo el procedimiento atentamente:

PROCEDIMIENTO
  • Con los dedos índice y pulgar de una mano, sujetar un extremo del porta normal (porta soporte), a nivel de sus bordes, y situarlo sobre la mesa. También puede apoyarse simplemente, el porta soporte sobre el extremo del dedo corazón de la mano que lo sujeta. De esta forma, el porta soporte forma un ángulo con la mesa.
  •  Con  una pipeta Pasteur, depositar una pequeña gota de sangre (de unos 5 ) en la cara superior de ese porta, a no menos de 2 cm del extremo opuesto al que agarra la mano.
  • Colocar un extremo del porta esmerilado (porta difusor o extensor) un poco por delante de la gota de sangre y formando un ángulo de 45º con el porta soporte. Es conveniente utilizar siempre el mismo porta extensor, para adaptarlo a esta función.
  • Desplazar suavemente hacia atrás el porta extensor, hasta que alcance la gota de sangre.
  •  Dejar que la gota se extienda, por capilaridad, a lo largo del extremo del porta soporte.
  • Antes de que la sangre alcance los bordes de ese extremo, deslizar el porta extensor hacia delante, con un movimiento firme y uniforme, y a una velocidad media. Este deslizamiento debe acabar, aproximadamente, a 1 cm del extremo final del porta soporte, con un movimiento de ascensión del porta extensor.
  • Secar rápidamente la extensión, agitándola al aire, para que sus células no se distorsione.
  • Escribir el nombre del enfermo en el porta que soporta la extensión.

Figura 2: Procedimiento



"TINCIÓN PANÓPTICO RÁPIDO"

Una vez realizado el frotis, tenemos que teñirlo para observar las diferentes células sanguíneas, para utilizaremos la siguiente tinción:


REACTIVOS:
Solución nº 1: solución alcohólica de triarilmetano
Solución nº 2: solución tamponada de santeño
Solución nº 3: solución tamponada de tiazina
Agua destilada

MUESTRA
Frotis sanguíneo preparado recientemente que se ha dejado secar al aire.
PROCEDIMIENTO:
  • En 3 cubetas de Wertheim o similares se disponen los colorantes solución nº 1, nº 2 y nº 3.
  • Colocar los frotis en el cestillo para portas y sumergir en la cubeta con la solución nº 1 durante 1 segundo. Repetir la inmersión 4 veces (en total 5 segundos). Dejar escurrir.
  • Sumergir a continuación otras 5 veces, cada una de un segundo de duración, en la cubeta con la solución nº 2. Dejar escurrir.
  • Finalmente, sumergir otras 5 veces de un segundo cada una en la cubeta con la solución nº 3.
  • Lavar con agua destilada y dejar secar.
  • Depositar una gota de aceite de inmersión sobre el frotis y observar con el objetivo de 100x
LECTURA DE RESULTADOS:
En el frotis podréis observar las células que se muestran en la imagen. Teneis que identificarlas y describir brevemente (en menos de 10 líneas) cúal es la función de cada de ellas.




Y si  en el frotis observaráis las siguientes imagenes? qué pensariaís?









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